植物组织培养即植物无菌培养技术,是根据
植物细胞具有
全能性的理论,利用植物体离体的器官(如根、茎、叶、
茎尖、花、果实等)组织(如
形成层、表皮、皮层、
髓部细胞、胚乳等)或细胞(如
大孢子、
小孢子、
体细胞等)以及
原生质体,在无菌和适宜的人工培养基及光照、温度等人工条件下,能诱导出
愈伤组织、
不定芽、
不定根,最后形成完整的植株的学科。
植物组织培养的理论依据是
细胞全能性学说。细胞全能性学说的内容为:植物体的每一个细胞都携 带有一套完整的
基因组,并具有发育成为完整植株的
潜在能力。在适当的条件下,植物的每一个细胞都 能分别分化和发育成不同的器官,发育成一个完整的植物体。
器官和组织培养是通过培养器官和组织的类别来分类的。如果培养的是花药,称为
花药培养;如果 是
胚珠,称为
胚珠培养;如果培养的外植体是叶,称为
叶培养;如果培养的外植体是茎,称为茎培养。 总之,培养的是什么器官或组织,就称为什么培养。本章介绍的组织培养即茎培养。
(1)光照:光照对离体培养物的
生长发育具有重要的作用。通常对愈伤组织的诱导来说,暗培养 比光培养更合适。但器官的分化需要光照,并且随着试管苗的生长,
光照强度需要不断地加强,才能使 小苗生长健壮,并促进它从“
异养”向“自养”转化,提高移植后的成活率。
(3)湿度:组织培养中的湿度影响主要有两个方面,一是培养容器内的湿度,它的湿度条件常可 保证?100%;二是培养室的湿度,它的湿度变化随季节和天气而有很大变动。培养室湿度过高过低都是 不利的,过低可能造成培养基
失水而干枯或
渗透压升高,影响
培养物的生长和分化;湿度过高会造成杂 菌滋长,导致大量污染。因此,培养某些耗氧多的植物,采用通气性好的瓶盖、
瓶塞或
透气膜封口的, 要求室内保持70%~80%的
相对湿度。湿度过高时可用
除湿机降湿,过低时可用喷水来增加湿度。
(4)氧气:植物组织培养中,外植体的呼吸需要氧气。在
液体培养中,
振荡培养是解决通气的有效办法。在
固体培养中,对于某些耗氧多的植物要采用通气性好的瓶盖、瓶塞,或用透气膜封口。对于 耗氧少的植物,组织培养中
培养瓶内能维持正常的氧气和
二氧化碳循环,用密封性好的封口材料更能有 效地防止菌类污染。 此外,愈伤组织在培养基上生长一段时间后,由于
营养物质的枯竭,水分的散失,以及一些组织代 谢产物的积累,必须将组织及时转移到新的培养基上。这种转移过程称为继代培养。一般在25~28℃下 进行固体培养时,每隔4~6周进行一次继代培养。在组织块较小的情况下,继代培养时可将整块组织转 移过去。若组织块较大,可先将组织分成几个小块
再接种。
组培苗的
炼苗,炼苗即驯化,目的在于提高组培苗对外界
环境条件的适应性,提高其
光合作用的能力,促使组培苗 健壮,最终达到提高组培苗移栽
成活率的目的。驯化应从温度、湿度、光照及有
无菌等
环境要素进行, 驯化开始数天内,应和培养时的环境条件相似;驯化后期,则要与预计的栽培条件相似,从而达到逐步适应的目的。驯化的方法是将长有完整组培苗的试管或三角瓶由培养室转移到半遮荫的
自然光下,并打 开瓶盖注入少量自来水,使组培苗周围的环境逐步与
自然环境相似,恢复植物体内
叶绿体的光合作用能 力,提高
适应能力。驯化一般进行?3~5?周。 很多树种也可不进行特别的驯化,或驯化与移栽同步。如桉树
试管苗直接移植后,通过遮荫和加强 喷水、防病等,就能保证移植顺利成活。
(二)提高栽培管理技术,提升兰苗质量,增加兰苗的自然
抗逆性。整个栽培环境做到清洁、通风、偏强光照,促使兰苗生长旺盛,自然会提高兰苗抵御病虫侵扰的能力。
(三)加强日常巡视,发现有病害的组苗应及时销毁,并进行
药物防治,将病害消灭在萌芽状态。药物防治可单独叶面喷施并灌根,也可和肥料混施。
(四)对于虫害,则可采取勤观察、早发现、早防治的措施,对症用药,如蜗牛可以用梅塔一类的
诱杀剂进行诱杀,对
介壳虫则可以用25%的
喹硫磷1000倍液直接喷杀,也可以用其他杀介壳虫的专用药物防治。