多重
PCR(multiplex PCR),又
称多重引物PCR或复合PCR,它是在同一
PCR反应体系里加上二对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的PCR反应,其反应原理,反应试剂和操作过程与一般PCR相同。一般PCR仅应用一对
引物,通过
PCR扩增产生一个核酸片段,主要用于单一
致病因子等的鉴定。
多重PCR的主要用于多种病原微生物的同时检测或鉴定某些
病原微生物、某些
遗传病及
癌基因的分型鉴定。
多种病原微生物的同时检测或鉴定,是在同一PCR反应管中同时加上多种病原微生物的
特异性引物,进行
PCR扩增.可用于同时检测多种病原体或鉴定出是那一型病原体感染,可系统组合的有:①肝炎病毒的感染,在同一病人或同一供血者体内,有时存在多种肝炎病毒
重叠感染,有时是甲乙
丙型肝炎病毒重叠;有时可能是甲
乙型肝炎病毒重叠;有时是乙丙型肝炎病毒重叠.②肠道致病性细菌的检测,如
伤寒,痢疾和
霍乱,有时具有较相同的肠道症状,有时
痢疾霍乱同存一病人并同时发病.③性病的检测,如
梅毒,
淋病及
艾滋病的诊断.④战伤细菌及
生物战剂细菌的检测,如
破伤风杆菌,
产气荚膜杆菌,
炭疽杆菌,
鼠疫杆菌等侦检.⑤需特殊培养的
无芽胞厌氧菌,如
脆弱类杆菌、艰难杆菌的鉴定等.
某些病原微生物,某些遗传病或
癌基因,型别较多,或突变或缺失存在多个好发部位,多重PCR可提高其
检出率并同时鉴定其型别及突变等可
系统应用的有:
乙型肝炎病毒的分型;
乳头瘤病毒的分型;
单纯疱疹病毒的分型;
杜氏肌营养不良症的分型及癌基因的检测等.
多种病原体在同一反应管内同时检出,将大大的节省时间,节省试剂,节约经费开支,为临床提供更多更准确的诊断信息.