挥发性脂肪酸,Volatile Fatty Acid, 简称VFA,是脂肪酸的一种分类,一般包括具有1~6个
碳原子碳链的
有机酸,包括
乙酸、
丙酸、
异丁酸、
戊酸、
异戊酸、正
丁酸等,它们的共同特点是具有很强的挥发性,故称挥发性脂肪酸。
乙酸、
丙酸、
丁酸、
戊酸、
异戊酸等广泛地存在于自然界中,它们的共同特点是具有较强的
挥发性,
生物学上一般称之为挥发性脂肪酸(VFA)。
挥发性脂肪酸是
厌氧消化过程的重要
中间产物,甲烷菌主要利用VFA形成甲烷,只有少部分甲烷由CO2和H2生成。但CO2和H2生成也经过高分子有机物形成VFA的中间过程。由此看来,形成甲烷的过程离不开VFA的形成,但是VFA在
厌氧反应器中的积累能反映出
甲烷菌的不活跃状态或
反应器操作条件的恶化,较高的VFA(例如乙酸)浓度对甲烷菌有
抑制作用。因此在反应器运行中,出水VFA用作重要的
控制指标。
在动物体内,对动物体代谢最为重要的有直链乙酸、
丙酸和丁酸,乙、丙、丁酸约占
瘤胃发酵VFA
总产量的95%,而乙酸产量最大,约占VFA总产量的70%-75%。挥发性脂肪酸在不同动物体内其比例和数量不同,如图1所示。挥发性脂肪酸不仅可作为
反刍动物能量代谢的表现形式,而且还具有许多调节功能。
实真胃中的VFA可抑制真胃的
收缩性,因此高
精料饲养条件下,
皱胃内VFA反射性地抑制复胃运动是高精料诱发复胃疾病的途径之一。
胃动素与胃运动的生理调控有关,可引起胃及
十二指肠强烈收缩,促进
胃排空,刺激
胃蛋白酶、
胰液分泌,胆囊收缩,增大
胃黏膜血流量。十二指肠的酸化或碱化可刺激胃动素的释放。输注VFA可提高山羊血浆胃动素水平,向
瘤胃内输注
乙酸、
丙酸、丁酸后胃动素水平升高;而皱胃内输注乙酸、丙酸、丁酸,(除乙酸外)与
对照组相比差异显著。VFA 对
胰岛素也有影响。
日粮影响
乳脂率的机理与
瘤胃VFA 的变化有关,瘤胃VFA 变化引起代谢变化。
VFA是肠道中抑制
病原微生物的重要因素,当VFA 浓度升高时可抑制
沙门氏菌的生长,肠道中抑制病原微生物的能力还与pH 值有关,而肠道内pH值又与VFA 含量有关。
VFA的产生和比例除与饲料本身有关,还受其他因素的影响,包括矿物质、
离子载体、动物年龄和采食时间、
有机物质、外流速度、
酶制剂、中草药、
健康情况等。
在
反刍动物中,乙酸,丙酸和丁酸是从瘤胃壁所吸收的,这是反刍动物能量的主要来源。许多因素会影响这些挥发性脂肪酸的吸收,例如VFA的浓度和比例、
瘤胃pH、瘤胃上皮血液
流动率等。反刍动物对于葡萄糖的吸收并不从瘤胃或小肠吸收,大多依赖
糖异生,因此依赖VFA。反刍动物能很快利用挥发性脂肪酸。
瘤胃内生成的VFA主要以酸性的离子形式被吸收,约80%经瘤、网
胃壁吸收,而其余VFA在
瓣胃和真胃吸收。不同种类的VFA
分子大小不同,其吸收速度不一,在瘤胃pH值>7时,乙酸>丙酸>丁酸,而pH值<7时,速度相反。
单胃动物饲料中淀粉中糖经消化所产生的葡萄糖,大部分可为小肠壁所吸收,剩余部分可被细菌分解而产生
有机酸,其中包括挥发性脂肪酸(乙酸、
丙酸、丁酸)及
乳酸;小肠中未被消化的淀粉和葡萄糖当转移到大肠(
盲肠、结肠)中时亦会受到细菌的分解而产生挥发性脂肪酸和气体。经
消化道吸收入体内的
营养物质首先经过
肝脏代谢,后进入
后腔静脉,经
肺循环进入动脉血流分布至外周体组织,而进入门静脉血流的丙酸、丁酸几乎全部为肝脏代谢,在动脉血流中浓度很低。
气相色谱法可用于分析VFA总量及其组成。
色谱柱分离后的馏出物被
载气携带进入
氢火焰离子化检测器的
喷嘴口,与氢气和空气混合燃烧,待测样品中的各组分依次电离为
正负离子,在离子室内形成离子流被收集极收集后,经放大为信号经
记录仪记录。此信号的大小即反映出各组分的含量。与
气相色谱连用的微机可以直接处理信号,经与标准进行比较后,可直接给出样品中各组分的浓度,其浓度可以以mg/L、
mmol/L、或mgCOD/L同时给出。
取水样若干毫升,加入等量的3%的甲酸溶液稀释,保证其pH值在3以下,如pH过高可加入硫酸调节。稀释后的水样
COD浓度应小于1000mg/L,否则增加3%甲酸溶液的加入量。记下水样的
稀释倍数。上述水样置于
离心管,在
高速微量离心机中以1000r/min离心5min后,即可取
上清液进样。
色谱柱:d2mm×2m
不锈钢柱,
内填国产GDX-102(表面
酸处理)
担体,60~80目。柱温:210℃,载气:氮气,
流率为90ml/min,空气流率:500ml/min,汽化室温度:240℃ 检测温度:210℃,选择中应注意色谱柱的质量。应利用振捣器和
真空泵装入担体,并事先以
玻璃纤维堵塞柱口,然后将色谱柱装入
色谱仪,进行
老化色谱柱的工作。在不连接
检测器的情况下,通入载气,并以4℃/min的
升温速度由60℃加热到200℃然后保持约4h,直到基线稳定为止。在每次使用时,都
应将色谱柱由60℃将柱温逐渐升高。
以
气相色谱分析VFA浓度的原理是根据比较
标准溶液中各组分和样品水样中相应组分的峰高和峰面积计算而来。但现代的气相色谱仪带有微机对个组分的
峰面积进行
自动积分,并与标准溶液中的相应组分的峰面积进行比较,同时根据水样的
稀释倍数计算出个组分的浓度并打印出结果。 如果所用气相色谱仪不带
积分仪,被测样品中某组分的浓度可按下式计算:测试结果还可用mgCOD/L或
mmol/L来表示,下表是每毫克或每毫摩尔的VFA与毫克
COD的换算关系,据此可在各单位间相互换算。
利用罗氏
真菌,通过葡萄糖与丙酸混合物为碳源来进行培养,可以获得
短链PHA。除此之外,还有其他类型的VFA
被作为底物进行PHA生产。例如,用
戊酸和葡萄糖作为底物,利用罗氏
真菌发酵50小时,PHA产量可达90.4 g/L。