生物化工产品products of bioprocesses是一大类为数众多的由各种生物反应过程,即包括、或等过程所获得的产品。它们的共同特点是以生物来源为主的物料为原料,通过的作用,在
生物反应器中形成,并通过的有关手段将其提取纯化。这些产品有的也可以用化学合成法生产,如等,究竟采用化学合成法或生物合成法应从经济技术的综合考虑决定;有些产品则仅能通过生物合成法生产或以生物合成更为经济合理,如、淀粉酶、
维生素B、干扰素等分子结构复杂的物质;有些产品的生产则兼用化学合成和生物合成法,如
半合成青霉素、
可的松、
维生素C等。
分类
生物化工产品按产品性质可分为:
①大宗化工产品,如
乙醇、
丙酮、
正丁醇、甘油、
柠檬酸、
乳酸、
葡萄糖酸等;
②
精细化工产品,如各种氨基酸、酶制剂、
核酸产品等;
③医药产品,如各种、多种
甾体和、常规菌苗、疫苗等;
④其他产品,如
生物农药、食用及药用
酵母、饲料蛋白(
单细胞蛋白)、
沼气等;⑤
现代生物技术产品,即通过和等方法生产的产品,如干扰素、单克隆抗体、新型疫苗等。
简介
丙酮、
丁醇 发酵生产丙酮和
正丁醇(简称丙-丁或丙酮-丁醇)工业始于1913年。
第一次世界大战爆发后,丙酮用于制造炸药和航空机翼涂料等用量激增。英国首先改造酒精厂为丙-丁工厂,继而又在世界各地建立分厂,以玉米为原料大规模生产丙-丁。战后由于与丙酮同时制得约有二倍量的正丁醇未发现可利用价值,丙-丁工业曾衰退停顿,当发现正丁醇是制造
醋酸丁酯作为
硝酸纤维素之最佳溶剂后,此工业又获得新生。目前,虽然丙酮和正丁醇主要由方法生产,但丙-丁发酵仍占相当比例。
发酵工艺
丙-丁发酵是严格厌气发酵,生产用菌种是丙丁梭菌,以淀粉质、糖质和纤维质为培养基。丙-丁发酵可用分批或
连续发酵法进行。大规模工业生产大都采用连续发酵(图1[连续式丙-丁发酵工艺流程示意]连续式丙-丁发酵工艺流程示意)。将合格的丙丁菌种试管斜面接入 61种子瓶,于38±1℃,培养18~22h;然后接入
种子罐,于40~41℃培养24h,镜检合格后输入活化罐,于40~41℃培养4h,然后从活化罐上部不断进入蒸煮醪(经灭菌和冷却后的料液),经活化的种子液不断从活化罐底部流向发酵罐;若干个
发酵罐相互串联,发酵醪流向是下进上出,从进入第一级罐到最后一级罐流出需时 24~36h左右。成熟发酵醪经多塔精馏,分别得到
丙酮、
正丁醇、
乙醇和
杂醇油。丙酮正丁醇、乙醇质量比约为3:6:1,每吨总溶剂可得CO、H等气体1.7t,其质量比
氢气占2.7%,CO占97.3%,因原料、菌种不同,溶剂比和废气比有所变化。
柠檬酸
又名
枸橼酸,是一种重要的有机酸,基本上用发酵法制得。1883年发现青霉能在含碳水化合物的上积累
柠檬酸,从此开始了发酵法生产的研究。到1923年固体浅盘发酵柠檬酸投入工业生产;1938年开始液体深层培养的研究,为柠檬酸深层发酵奠定了基础。
发酵工艺
柠檬酸发酵是好气发酵。培养基以糖质、淀粉质和石油(正构
石蜡烃)等原料,另加入少量无机氮源和微量元素,如(NH)SO、KHPO、MgSO7HO 等。菌种是
黑曲霉和解脂
假丝酵母(
石油发酵用菌种)。
发酵过程最适pH2.0~2.5,培养80~100h。发酵结束后,发酵液经过滤、脱色、浓缩、结晶、分离、干燥得柠檬酸成品。柠檬酸主要用于食品工业作
酸味剂,也作油脂的抗氧剂。医药工业上
柠檬酸铁铵、
柠檬酸钠作为补血剂和输血剂。化学工业上柠檬酸酯作为无毒增塑剂,用于制包装食品用
塑料薄膜。还可作为工业管道的清洗剂和混凝土的
缓凝剂等。
氨基酸
是一类具有一个或多个氨基和一个或多个
羧基的有机化合物。将蛋白质或多肽用酸
水解可得到20种左右重要的氨基酸,这也是较原始的氨基酸生产方法。1957 年,日本协和发酵公司用
谷氨酸棒状杆菌从
葡萄糖发酵生产
L-谷氨酸(用发酵法生产的氨基酸均为
L-氨基酸)。现在绝大多数的重要氨基酸都可通过及生产。氨基酸主要用于医药、
食品添加剂、人造皮革、化妆品等方面。酶的来源为微生物、动物和植物。由于动、植物生产的酶几乎均可从微生物制取,而微生物又容易培养、繁殖快、产量高,所以酶制剂的工业生产主要指工业上应用微生物学方法进行酶的
大量生产。
●发酵工艺
中国古代的制曲
酿酒或作酱,实际上就是一种最早的
微生物酶类的生产方式。1949年,日本采用深层培养法生产细菌 -淀粉酶,微生物酶制剂的生产才进入大规模工业化阶段。中国生产微生物酶制剂是从1964年开始的,20多年来中国酶制剂工业发展很快,目前生产的酶制剂已有30多种。酶制剂的具体生产过程有多种,因微生物种类多,产生的酶系不同而有所差别,这些过程可分成两大类:液体深层发酵法和半固体培养法(图2[深层发酵和
半固体培养流程示意]深层发酵和半固体培养流程示意)。目前多采用前者,半固体培养法是传统的生产
淀粉酶和蛋白酶的方法。酶分为
胞内酶和
胞外酶两种,胞内酶须先进行菌体破碎再抽提,胞外酶则可直接从发酵液中提取。经离心或过滤,低温真空蒸发浓缩至一定浓度,浓缩液可直接作为商品。经浓缩后的浓缩液也可进行沉淀、过滤、干燥后制成酶粉。在实际使用中随着目的的不同,酶成品的剂型和纯度要求也不同,大多数酶制剂是以自然制取的混合物作为商品,混合物中次要成分在应用上也起着重要作用,可加盐、淀粉等惰性物质把酶的含量调节到所需浓度。
疫苗
用细菌、病毒、
立克次体和
衣原体等病原体制备的生物化工产品。在中国把由细菌制成的疫苗称作菌苗。用弱化毒性或减毒的活病原体制成的为活疫苗,如
牛痘、
麻疹疫苗等;用化学或物理方法杀死的病原体制成的是死疫苗,如
乙型脑炎、
狂犬病疫苗等。
中国在16世纪(明隆庆年间)即有以轻症天花病人的
痘疹接种于鼻内作预防的方法。到17世纪已相当风行,并先后传至俄罗斯、朝鲜、日本及欧洲各国。后来 E.詹纳发明了牛痘疫苗,即被广泛用来代替鼻苗。19世纪,L.巴斯德发明以弱
毒菌为菌苗,使疫苗的制备获得进一步的发展。菌苗一般均可在严格的环境和设备条件下,用
微生物培养方法进行生产,而疫苗的生产必须通过动物或
人体细胞的培养才能获得,技术复杂,生产规模也受到限制。若采用重组DNA技术获得的
工程菌生产疫苗,则可用类似微生物培养的技术进行。例如
乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)在
大肠杆菌、
酵母或
哺乳动物细胞中得到表达,通过酵母表达来生产的HBsAg,美国已于1986年获准使用。
细胞蛋白
微生物菌体内含有丰富的蛋白质,大多数用于生产的微生物是从单一的或者丝状的个体形式生长的,由此得名,简称SCP,可用作
动物饲料,生产SCP的微生物除了
面包酵母、
啤酒酵母、产朊圆
酵母、
热带假丝酵母等常被选为生产菌种外,也可用
丝状真菌或细菌。在工业生产条件下,
单细胞蛋白中蛋白质的含量约为50%(
干基)。常以制糖厂的废料
糖蜜,某些制酒厂、造纸厂的废液,农、林下脚料中可获得的诸如糖、淀粉和纤维素等有机物作为原料。所以,减少环境的污染是研究和开发这类原料生产 SCP的一个动力。以、等石油化工产品为原料,生产单细胞蛋白在商业上已引起广泛的兴趣,若干规模宏大的生产过程已在进行。
大多数SCP生产过程是在无菌条件下进行的,成品必须不受其他微生物,尤其是人体病原体的污染。由于设备投资大,运行动力消耗多,为获得经济效益,工厂须至少拥有年产万吨级的规模,尽量采用
连续培养技术提高生产率。同时,要求提供价格低廉,供应方便的原料。
沼气
形成于沼泽底部的可燃性气体。主要成分是占60%~70%(体积),其次为
二氧化碳及少量
氮气。其成因是沉积在沼泽底部的植物残体,在隔绝空气的情况下,由于嫌气性微生物(包括甲烷化细菌)的作用腐败分解所致。其简单的反应过程是(以纤维素为例):人畜粪便、动植物碎料、污水和垃圾等有机物,在嫌气细菌和隔绝空气条件下经沤化(发酵),也能产生
沼气。
发酵制气
农村制造
沼气需要建造不漏气的发酵池,并设有加料、贮气和清渣装置。发酵制气时须掌握下列条件:①温度25~35℃;②pH6.8~7.2;③含水量约90%;④常压并经常搅拌;⑤发酵时间10~20天;⑥适当施加含磷、氮等营养料以助嫌气细菌的繁殖。
沼气
热值约为19.6~29.4MJ/m,可作使用;产量大的制气装置,气体经净化脱
二氧化碳、
硫化氢后可作动力燃料;还可使用沼气点灯照明。
沼气池内经发酵后的残渣,其氮、磷、钾等相对含量比新鲜物为高,且其中大量的害虫卵、杂草籽在发酵过程中被无害化,是很好的农肥。
沼气与空气混合,
甲烷含量在5%~15%(体积)时形成爆炸性气体,遇明火即爆炸,故生产、贮运和使用时要防止泄漏,注意安全。
干扰素
在
人体细胞经受病毒攻击诱导后可产生一种对抗病毒的人干扰素,大多数脊椎
动物细胞的干扰素是
细胞分泌的一类功能性蛋白质,它不仅具有抗病毒的活性,还具有参与机体的
自然免疫作用。干扰素曾试用于治疗多种病毒病和肿瘤,因此引起人们极大的兴趣。可供生产人干扰素的细胞有三种(表2[ 三种可供大量生产人干扰素的细胞] 三种可供大量生产人干扰素的细胞)。目前,生产上大量获得干扰素有两个主要途径;一是通过动物细胞大量培养;二是利用
重组DNA技术。1986年8月,美国食物与药品管理局(FDA)已批准将重组DNA技术生产的-干扰素用于治疗多种
白血病。
克隆抗体
利用免疫动物(指外源
抗原物质侵入机体后已产生免疫力的动物)的
脾脏细胞 (
B淋巴细胞,能产生识别、破坏和排斥外来抗原的抗体),与具有酶缺陷的
骨髓瘤细胞,经
细胞融合技术处理后形成的杂交瘤所产生的一种生物化工产品。
单克隆抗体由于特异性强,灵敏度高,因此主要用于临床化学试剂作有关病毒及微生物等病源体的诊断。若将药物、毒素或同位素与单克隆抗体相结合,有可能形成有选择性杀伤某些病害细胞的治疗剂。
单克隆抗体的生产除了可将杂交瘤接种于小鼠、白兔等腹腔中进行繁殖外,也可采用
动物细胞培养设备进行
悬浮培养,由于单克隆抗体能从
杂交瘤细胞中分泌到培养液中,对产品的提取带来有利条件,它的精制主要采用
层析分离法。