阪崎肠杆菌(又称阪崎氏肠杆菌)是
肠杆菌科的一种,1980年由黄色
阴沟肠杆菌更名为阪崎肠杆菌。阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿
脑膜炎、
小肠结肠炎和
菌血症,
死亡率高达50% 以上。微生物学家尚不清楚阪崎肠杆菌的污染来源,但许多
病例报告表明婴儿配方粉是发现的主要感染渠道。
基本简介
阪崎肠杆菌是乳制品中新发现的一种致病菌
阪崎肠杆茵的生物学性状及其对人群的健康危害受到人们的关注并被报告。阪崎肠杆菌是奶粉(乳)制品中新发现的一种致病菌。由其引发的婴儿、
早产儿脑膜炎、
败血症及
坏死性结肠炎散发和暴发的病例已在全球相继出现。多份研究报告表明
婴儿配方奶粉是当前发现致婴儿、早产儿脑膜炎、败血症和坏死性结肠炎的主要感染渠道,在某些情况下,由阪崎肠杆菌引发疾病而导致的
死亡率可达40%~80%。阪崎肠杆菌已引起世界多国相关部门的重视。据报道,国外乳业巨头曾因此被召回.在美国FDA2002年在本土某一些国际乳业巨头生产的婴儿配方奶粉中检出阪崎肠杆菌后,2003年又一家国际乳业巨头公司
主动召回在美国生产的一批检出极微量阪崎肠杆菌的罐装
早产儿特殊配方奶粉,阪崎肠杆菌从此成为世界瞩目的焦点。但是国内企业没有自查能力,原因是国内以前还没有专门的检测手段,而去买一套以前国内从未有过的
检测设备也不是马上就可办到的。,国外 奶粉(乳)制品巨头却拥有检测手段,惠氏中国宣称保证在中国销售的每一个产品都经过了阪崎肠杆菌的检测才上市。同样宣称设有此检测设备的企业还有
美赞臣中国公司。
在国外发现的奶粉中的阪崎肠杆菌并非有其特定的区域局限性,中国奶粉企业又面临一项大难题。
2005年5月20日,由
中国检验检疫科学研究院和
天津出入境检验检疫局牵头完成的《奶粉中阪崎肠杆菌检测方法》行业标准在京通过了审定。这项标准的出台,解决了中国检测
婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌无标准、无检测方法的问题。10月该标准被实施。
该标准建立了阪崎肠杆菌的改进的传统检测方法、普通
PCR方法和荧光PCR方法。
据了解,阪崎肠杆菌是乳制品中新发现的一种致病菌。它是存在
自然环境中的一种“
条件致病菌”,已被
世界卫生组织和许多国家确定为引起婴幼儿死亡的重要条件致病菌,可导致任何年龄层人群的疾病,尤其是对
早产儿、
出生体重轻的婴儿或免疫受损婴儿的威胁最大,严重者可导致
败血症、
脑膜炎或
坏死性小肠结肠炎。
继美国FDA2002年在本土某一些国际乳业巨头生产的
婴儿配方奶粉中检出阪崎肠杆菌后,2003年又一家国际乳业巨头公司主动召回在美国生产的一批检出极微量阪崎肠杆菌的罐装早产儿
特殊配方奶粉,此后成为世界关注的焦点。中国在2005年5月通过《奶粉中阪崎肠杆菌检测方法》行业标准的审定,对奶粉严查此菌。
以来,广州、
中山、
汕头检验检疫部门在
食品工业用进口奶粉中已多次检出阪崎肠杆菌。
控制危险
制定
婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌微生物标准,建立有效控制措施,将其危险性降低到最低。
制定加工、使用和操作婴幼儿配方食品的导则
研究降低阪崎肠杆菌
污染水平的方法,在
生产环境和
配方奶粉中降低阪崎肠杆菌的浓度和流行的危险性;为
高危人群生产较大比例的
商业无菌配方
替代产品。
制定有效的环境监测计划
将
肠杆菌科而不是
大肠杆菌作为工业生产线的
卫生指标菌。
建立实验室监测网络
对阪崎肠杆菌的来源、
传播途径等进行调查研究;加强相关学科的
基础研究,包括
生态学、
分类学、菌株
毒力等。
用商业无菌液体或开水冲调配方食品
喂养婴幼儿后剩余的调配食品应放置冰箱保存,并在食用前再加热。中国应根据实际情况制定相应
管理办法,加强对阪崎肠杆菌的检测技术及控制
技术研究,进一步完善婴幼儿配方
食品标准,以保证中国广大婴幼儿群体的健康与安全。
检测必备
实时荧光定量PCR检测系统也叫
实时荧光定量核酸扩增检测系统(英文全名是Real-time Quantitative PCR Detection System),简称实时荧光
qPCR,qPCR的核心是
实时荧光定量PCR仪及与其配套的检测分析
软件系统。
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction简称PCR)原理凭借敏感、特异、快速的特点荣获1993年
诺贝尔化学奖。因其在
病原体检测方面的
独特优势,因而
发达国家在
相关方法和仪器方面的研发非常快,成为
分子生物学诊断的主流,仍处于学术和应用前沿,发展三代产品:第一代PCR定性
检测技术及设备由
基因扩增热循环仪(DNA Thermal Cycler)+
电泳仪+
紫外分析仪+定性试剂构成;第二代PCR-DNA终点定量技术及设备(End-point quantitative PCR detection)由基因扩增热循环仪+荧光仪+终点定量试剂构成,其又分为终点酶免定量(End-point ELISA-PCR)和终点
荧光定量(End-point Flour-PCR)两种;第三代产品为Real-time qPCR-DNA/
RNA实时荧光定量检测。
qPCR检测灵敏度高,检测
线性范围宽,检测精度和
重复性好等突出优势,因此被公认为世界用于临床及科研的最先进
核酸分子诊断技术,被美国
FDA承认并推崇。检测项目包括:食物等
病原菌以及疾病
病毒等病原体如:乙肝病毒HBV DNA,丙肝病毒
HCV RNA,
艾滋病病毒HⅣ RNA,
沙眼衣原体CT,
淋病双球菌NG,
巨细胞病毒CMV,
结核分支杆菌Mtb、
禽流感、阪崎肠杆菌、
口蹄疫、
新城疫、
猪瘟、
大肠埃希菌O157∶H7、
沙门菌、
炭疽芽孢杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、
寄生虫病等。
PCR仪的
应用范围广,几乎所有的
生命科学领域都要涉及:食品检测、
临床检验、疾病控制、
检验检疫、科研实验室、
食品安全、
化妆品检测、环境卫生等。国内多家试剂厂商生产了包括
肝炎、
性病、
优生优育、
呼吸道疾病、禽流感、阪崎肠杆菌、口蹄疫、新城疫、猪瘟、大肠埃希菌O157∶H7、
沙门菌、
炭疽芽孢杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、寄生虫病等在内的数十种
荧光定量PCR试剂盒,购买方便,价格便宜,并获得了国家相关认证。
值得一提的是鉴于当前
流行病的频发以及
实时荧光定量PCR技术的实际应用,国内外已将实时荧光定量PCR检测技术强制应用于相关行业并相继制定了国际、国家、及
行业标准作为法律依据。例如:
SN/T 1632.3-2005 奶粉中阪崎肠杆菌检验方法
荧光PCR方法
GB/T 19438.1-2004
禽流感病毒通用荧光
RT-PCR检测方法
GB/T 19438.2-2004 H5 亚型禽流感病毒荧光
RT-PCR 检测方法
ISO22174-2005 食物病原体PCR检测方法
相对于价格十分昂贵的进口仪器,选择质量性能与进口仪器相当而售价只有进口仪器三分之一甚至五分之一的优质国产
荧光定量PCR仪是国内绝大多数用户的必要选择,也是国家卫生主管部门、国家
卫生部临床检验中心以及
国家食品药品监督管理局提倡的;
使用质量性能与进口仪器相当的国产
荧光定量PCR仪能为国家节省大量外汇,使更多的用户能够拥有先进的
实时荧光定量PCR技术和设备,同时还能促进国产仪器的
技术进步、民族产业的发展,利国利民。
西安天隆科技有限公司生产的TL988型
实时荧光定量PCR仪经过国家药监局指定的、具有国家质量检验检疫局认定的具有
CNAL全球互认检测资质的检测中心检测合格,性能达到
同类产品国际先进水平,并通过两家国家药物临床基地临床试验,获得了国家食品药品监督管理局SFDA核发的
医疗器械注册证,并符合国家卫生部颁发的《临床基因扩增检验实验室管理规范》和《临床基因扩增检验实验室工作规范》。
2005年中国
科研人员围绕着阪崎氏肠杆菌的分类、致病机理、危害评估、减少污染措施、检测方法仪器和标准等进行了研究,
相关研究论文包括:
阪崎肠杆菌的
生物学性状与健康危害,裴晓燕,
刘秀梅, 中国疾
控制中心营养与食品安全所
乳制品中的阪崎肠杆菌可致婴儿死亡,
中国食品产业网2008年5月28日10:56
乳品检测中
实时荧光定量PCR仪的研制,
彭年才,
苏明权,
张镇西,中国乳品工业,CN23-1177/TS200705:62-64;
乳制品中阪崎肠杆菌的快速检测,彭年才,
李明,
食品安全导刊,CN11-5478/R 2008.07;
婴儿奶粉中阪崎肠杆菌及其检测,彭年才,张镇西,苏明权,中国乳业,CN 11-4768/S,2008.08。
浅析乳品中高危害食品源性
致病菌阪崎肠杆菌的快速检测,彭年才
内蒙古乳业 P18-20,2008,03
婴儿配方
引言
⒈婴儿(0至12个月)受阪崎氏肠杆菌感染的个案罕有发生,但因可危害婴儿的性命而引起多个国家关注。越来越多的报告指出,
婴儿配方奶粉是有关感染个案的
传播媒介。
阪崎氏肠杆菌
⒉阪崎氏肠杆菌这病原体一般只感染
免疫系统较弱的人士,它对公众健康的影响日渐令人关注。阪崎氏肠杆菌是一种属革兰氏阴性、不会形成孢子而呈棒状的细菌,最适宜在
摄氏 37度至43度之间生长。
⒊阪崎氏肠杆菌可令各年龄组别的人受入侵性感染,但新生儿(出生28天或以下)和不足2个月的婴儿,尤其是早产、体重不足2.5公斤和免疫力较弱的婴儿的风险最高。
⒋新生儿(尤其是早产婴儿)的胃的酸性较成年人为低,这可能是阪崎氏肠杆菌可在婴儿体内生存的一个主要因素。
⒌感染阪崎氏肠杆菌而引致的
菌血症或
脑膜炎偶有发生,亦曾小规模爆发。虽然婴儿可在任何年龄出现有关疾病,早产婴儿较多在
新生儿期后出现菌血症,足月婴儿则较多在新生儿期出现脑膜炎。上述的不同情况,可能与婴儿在不同时间感染到阪崎氏肠杆菌而非与婴儿易受感染的因素有关。
⒍现时对于阪崎氏肠杆菌的生态所知不多。阪崎氏肠杆菌是存在于环境中的一种生物,常见于生产
婴儿配方奶粉的设施和家居环境中。
⒎婴儿配方奶粉虽然并非
无菌产品,但如能正确地冲调和贮存婴儿配方奶粉,可大大减低受阪崎氏肠杆菌感染的风险。
给家长们的建议 ⒏
世界卫生组织建议,婴儿在出生后首6个月,应只以
母乳喂哺,这对婴儿的成长、发展和健康都是最理想的。如母亲因为任何原因而不能以母乳喂哺,在家中或在护理机构照顾婴儿的人士都必须留意,婴儿配方奶粉并非无菌产品,可能受可导致严重疾病的
病原体污染。如欲安全冲调婴儿配方奶粉,首先必须把喂哺和冲调婴儿配方奶粉的器具加以清洗和消毒。
⒐根据
联合国粮食及农业组织与世界卫生组织合编的《安全制备、贮存和操作
婴儿配方奶粉指导原则》,应使用温度不低于摄氏70度的水来冲调婴儿配方奶粉,以杀死奶粉中的阪崎氏肠杆菌(即可使用待凉不超过30分钟的沸水)。冲调好的奶应冷却至可喂哺的温度,然后立即饮用。冲调好的奶若在冲调后两小时内仍未被饮用就应该倒掉。
⒑冲调好的奶若非即时饮用,应立即冷却,并贮存在摄氏4度或以下的雪柜内,但贮存时间不宜超过
24小时;要在喂哺前才可重新加热冲调好的奶,
加热时间也不应超过15分钟。加热好的奶若在冲调后两小时内仍未被饮用就应该倒掉。不过,建议在每次喂哺前才冲调新鲜的奶,避免贮存冲调好的奶。不应贮存使用不足摄氏70度的水冲调的奶,以供备用。
⒒
低温保存的奶瓶可以放在盛有温水的容器中加热,要确保水的高度不要超过瓶顶,偶尔摇晃或转动一下奶瓶,以确保加热均匀。切勿使用
微波炉配制或加热婴儿的奶,因为微波炉的热力
不均匀,可能产生“热点”,
烫伤婴儿口腔。
⒓
高风险婴儿若非以
母乳喂哺,父母或照顾婴儿的人士应尽可能采用经
商业无菌处理的液态配方。
临床表现
多数患儿临床症状轻微且不典型,易被忽略。严重者可引起
坏死性小肠结肠炎、
败血症、
脑膜炎等。
(一)全身症状:
发热,新生儿可表现为体温不升、
精神萎靡、拒乳、
黄疸加重,面色发灰、皮肤
发花甚至出现休克。
(二)
消化系统症状:可有呕吐、
腹胀、腹泻、
粘液血便,肠鸣音减弱甚至消失,严重时可发生
肠穿孔和
腹膜炎。
(三)
神经系统症状:烦躁、哭声尖直、
嗜睡甚至昏迷,可出现凝视、
惊厥,查体可有
头围增大、
颅缝裂开、
前囟张力增高、
脑膜刺激征阳性。
临床治疗
(一)轻症病例应加强护理,
对症治疗,保证液体和
电解质的摄入,并注意随访。
(二)出现明显肠道症状者应选用
抗菌药物治疗,可选择
阿莫西林/
克拉维酸等抗菌药物,并根据
药敏试验结果进行调整;可同时应用肠粘膜
保护剂和
微生态制剂。
(三)重症病例可选用
头孢他啶、
头孢吡肟、美洛培南等进行抗菌治疗,并根据临床治疗效果和药敏试验结果进行调整。应加强对症支持治疗;
坏死性小肠结肠炎患儿要禁食,腹胀严重者要给予
胃肠减压,必要时
外科手术治疗;
脑膜炎患儿给予镇静、止惊、降颅压及针对
并发症的治疗;有休克表现时及时给予抗
休克治疗。
近期动态
美国俄克拉荷马州一名婴儿被检测出对阪崎肠杆菌(Cronobacter)呈阳性反应,此前该病菌已导致一名婴儿死亡,另一名患病。美国正对
婴儿配方奶粉进行调查。
美国疾病防控中心发言人Barbara Reynolds周二表示,阪崎肠杆菌有时会导致新生儿罕见疾病,以前在婴儿配方奶粉中曾发现该细菌。
俄克拉荷马州
卫生部的Leslea Bennett-Webb称,最新检测出阳性反应的这名婴儿还不到一个月大,未食用过
美赞臣(Mead Johnson Nutrition)(MJN.N: 行情)Enfamil婴儿配方奶粉,入院治疗後已出院。
这是近几周发生的第三起阪崎肠杆菌病例,此前该病菌已导致
密苏里州一名婴儿死亡,
伊利诺伊州一名婴儿患病,正在康复中。
美国食品药物管理局称,密苏里州那名婴儿曾食用Enfamil配方奶粉,而伊利诺伊州那名婴儿曾食用Enfamil以及其它多种品牌配方奶粉。
沃尔玛(
WMT.N: 行情)等美国零售商已将Enfamil奶粉下架,但联邦调查人员尚未发现病例与该奶粉存在关联。
阪崎肠杆菌
显色培养基用途:用于
婴儿奶粉以及其他食品中的阪崎肠杆菌的快速鉴定和计数使用方法:
⒈取瓶内干粉39.6克,加入
蒸馏水或
去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃
高压灭菌15min;冷却至50℃,摇匀倒平板。在室温可保存一天或在冰箱里贮存数天(避光,4℃)。
⒉取样品333.0克按MPN三管法分别取100.0克、10.0克和1.0克分装在各三个2000.0ml、250.0ml和100.0ml的三角瓶中,在三角瓶中已装有经45℃预热的9/10(样品为1/10)的无菌蒸馏水,摇匀,在36℃培养18~22小时(SN和FDA方法)。
⒊各取10.0ml上述
悬浮液加到装有90.0mlEE肉汤(022160)的150.0ml的三角瓶中,在36℃增菌培养18~22小时。
⒋用划线或涂布法把
混匀的EE肉汤接种到阪崎肠杆菌显色琼脂平板上,35~37℃培养18~24小时。
⒌可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管试验,对疑似阪崎肠杆菌
菌落进行生化鉴定。
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。
贮存期二年。